단축키
Prev이전 문서
Next다음 문서
단축키
Prev이전 문서
Next다음 문서
비타민 D의 식이 섭취에는 비타민 D3(vitD3), 25-하이드록시비타민 D3(25OH-D3) 및 비타민 D2(vitD2)가 포함됩니다. 그러나 다양한 종의 생리 활성은 과학적으로 확립되지 않았습니다. 이 연구의 가설은 vitD3, 25OH-D3 및 vitD2가 혈청 내 25-하이드록시비타민 D(비타민 D 상태)에 동일한 효과를 갖는다는 것입니다. 가설을 테스트하기 위해 무작위 교차 연구를 수행했습니다. 12명의 젊은 남성이 4주간의 도입 기간 동안 10μg/일 vitD3를 섭취한 후 3×6주 동안 10μg/일 vitD3, 10μg/일 25OH-D3 및 10μg/일 vitD2를 섭취했습니다. 혈청 내 vitD3, vitD2, 25OH-D3 및 25-하이드록시비타민 D2(25OH-D2)의 함량은 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(LC-MS/MS)으로 정량화되었습니다. 세 가지 비타민 D 공급원이 비타민 D 상태에 동일하게 영향을 미친다는 가설은 기각되었습니다. 하루 1μg vitD3가 1.96nmol/L의 비타민 D 상태 증가를 나타낼 것이라는 가정에 기초하여 결과는 23μg vitD2 및 6.8μg 25OH-D3가 10μg vitD3와 유사하다는 것을 보여주었습니다. 이러한 결과는 생물학적 쥐 모델에서 평가된 총 비타민 D 활성을 대체하기 위해 개별 비타민 D 대사산물의 화학적 정량화를 기반으로 총 비타민 D 활성을 정량화하는 방법을 결정하기 위한 추가 조사가 필요하다는 것을 보여줍니다.
1. 소개
비타민 D의 식이 섭취에는 모체 비타민 D3(vitD3) 및 비타민 D2(vitD2)와 수산화 형태인 25-하이드록시비타민 D3(25OH-D3) 및 25-하이드록시비타민 D2(25OH-D2)가 포함됩니다. VitD3와 25OH-D3는 생선, 계란, 육류 및 유제품에서 발견되며[ 1 ], vitD2는 야생 버섯에서 발견되는 반면, 쇠고기와 유제품에는 vitD2와 25OH-D2가 포함되어 있습니다[ 2 , 3 ]. 식품 내 총 비타민 D 활성을 계산하려면 다양한 비타민 D 형태 간의 전환 계수가 필수적입니다. 그러나 총 비타민 D 활성에 대한 다양한 형태의 기여는 논란의 대상입니다[ 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 ].
비타민 D 상태에 대한 vitD3 및 vitD2의 식이 섭취 효과를 비교한 연구는 체계적인 검토 및 메타 분석을 통해 평가되었습니다[ 6 ]. 전반적인 결론은 비타민 D를 1회 또는 매월 볼루스로 투여한 경우 vitD3가 vitD2보다 비타민 D 상태 증가에 우월한 반면[ 10 , 11 , 12 ], vitD2와 vitD3의 경우 비타민 D 상태에 차이가 관찰되지 않았다는 것입니다. 매일 투여되었다 [ 10 , 13 , 14 , 15 , 16 ]. 25OH-D2 반감기 대 25OH-D3 반감기에 대한 조사에서는 영국 참가자의 경우 각각 15.1일과 15.6일로 차이가 없었지만 감비아 참가자의 경우 차이가 12.8일과 14.7일로 나타났습니다. 더욱이, 반감기는 비타민 D 결합 단백질의 농도와 유전자형에 의해 영향을 받았습니다[ 17 ]. vitD3와 25OH-D3의 경구 섭취 사이의 생체 활성 차이를 조사한 연구는 적습니다. 검토에서는 쥐 모델에서 25OH-D3의 vitD3 함량에 대한 변환 계수가 1에서 5 사이라는 결론을 내렸습니다. Rachitic 쥐의 석회화 점수 테스트에 따르면 25OHD의 생물학적 활성은 비타민 D의 생물학적 활성보다 1~2배 더 큰 반면, 5배는 칼슘의 장내 흡수를 사용하여 결정되었으며 이는 허용되는 임상 종점 매개변수가 아닙니다. 7 ]. 이유부터 도축될 때까지 매일 vitD3와 25OH-D3를 먹인 도살 돼지에 대한 사료 연구에서는 비타민 D 상태를 증가시키는 두 대사산물의 효능이 동일한 것으로 나타났습니다[ 18 ]. 반면 매일 보충제를 섭취하는 돼지에 대한 다른 연구에서는 25OH-D3는 비타민 D 상태를 증가시키는 데 VitD3보다 2~3배 더 효율적인 것으로 나타났습니다[ 19 , 20 , 21 ]. 그러나 vitD3와 비교한 비타민 D 대사산물의 전환 인자는 인간을 대상으로 한 연구를 기반으로 하는 것이 바람직합니다. 지금까지 인간을 대상으로 매일 보충하는 무작위 대조 연구는 소수에 불과했으며 전환 계수를 2에서 5 사이로 설정하기 위한 다양한 연구 설계 및 계산 전략이 적용되었습니다[ 8 , 9 , 22 ].
Jakobsenet al. ( 2009 )은 폐경 후 여성을 대상으로 4~8주의 도입 기간을 사용한 후 16주~20개월 동안 매일 5~10μg의 vitD3를 보충한 4개의 개별 무작위 대조 시험(RCT) 결과를 보고했습니다. ]. 개별 피험자 내에서는 도입 기간부터 중재가 끝날 때까지 비타민 D 상태에 유의미한 차이가 관찰되지 않았으나 개인별 비타민 D 상태는 48nmol/L에서 120nmol/L 범위로 큰 변화를 보였습니다.
일일 보충에 의한 비타민 D 상태의 증가는 곡선적인 것으로 나타났습니다[ 24 , 25 ]. 개별 연구에서는 미국 네브라스카주 오마하에서 북위 41.2°에서 실시한 연구에서 일일 0~250μg vitD3 보충을 기준으로 vitD3 식이 섭취량 1μg당 0.70nmol/L의 증가가 있을 것으로 추정했습니다[ 26 ]. 그러나 북위 51~54°의 아일랜드에서 실시된 연구에서는 0~15μg vitD3/일 보충을 기준으로 vitD3 1μg당 1.96nmol/L입니다[ 27 ]. 매일 5~50μg의 vitD3를 투여한 신중한 연구 선택을 바탕으로 1μg의 vitD3가 비타민 D 상태를 2nmol/L 증가시키는 것으로 결론지었습니다[ 28 ].
이 인간 개입 연구의 목적은 보충제로 제공된 동일한 양의 vitD3, vitD2 및 25OH-D3가 20~30세의 건강한 남성을 대상으로 혈청 내 25-하이드록시비타민 D(S-25OHD)로 측정된 동일한 생체 활성을 나타내는지 조사하는 것이었습니다. 무작위 크로스오버 디자인에 수년이 걸렸습니다. 또한 가설이 받아들여지지 않은 경우 목표는 vitD3, vitD2 및 25OH-D3 간의 생체 활성 차이를 평가하는 것이었습니다.
2. 재료 및 방법
2.1. 무작위 대조 시험
20~30세의 건강하고 자유롭게 생활하는 총 12명의 성인 남성이 3×6주간의 비타민 D 중재 실험에 모집되었습니다. 피험자들은 대학 캠퍼스 주변에 게재된 광고를 통해 코펜하겐 대학교 학생들 중에서 모집되었습니다. 자원봉사자는 BMI > 27 kg/m 2 , 지난 3개월 이내에 헌혈한 경험이 있는 경우, 만성 질환이 있는 경우, 간헐적으로 진통제를 사용하는 것을 제외하고 정기적으로 약을 복용하는 경우, 고칼슘혈증이 있는 경우, 과도한 음주를 하는 경우, 자원 봉사자에서 제외되었습니다. 또는 알려진 흡수장애 증후군이 있었습니다. 또한, 태양 노출을 줄이기 위해 연구 기간 동안 스키를 타거나 55° N 남쪽으로 여행할 계획인 지원자는 제외되었습니다. 모든 피험자는 백인이었고 습관적으로 생선 섭취량이 적었으며(주 2회 미만) 비흡연자였습니다. 선별검사에서 모든 피험자는 연구 기간 동안 동일한 수준의 신체 활동을 유지하도록 지시받았으며 헌혈을 자제하고 연구에서 제공된 보충제 이외의 모든 종류의 비타민, 미네랄 또는 식이 보충제를 섭취하지 않는 데 동의했습니다. 모든 피험자는 또한 중재 기간 동안 일광욕실에 가는 것을 삼가는 데 동의했습니다.
이 연구는 코펜하겐 지역 연구 윤리 위원회와 Frederiksberg의 승인을 받았습니다. 모든 참가자는 헬싱키 선언에 따라 서면 동의를 받았습니다. 이 시험은 번호 KH 01 322182( www.clinicaltrials.gov ; KH 01 322182) 로 등록되었습니다 .
2.1.1. 연구의 이론적 근거와 설계
본 연구는 성인 남성에게 매일 10μg vitD3, 10μg vitD2 및 10μg 25OH-D3가 포함된 정제를 무작위 순서로 투여하도록 배정하는 이중 맹검 무작위 교차 시험으로 설계되었습니다. 개입 전, 모든 피험자는 비타민 D 상태의 안정적인 상태를 달성하기 위해 4주 동안 매일 10μg의 vitD3를 투여받았습니다.
2.1.2. RCT용 정제
비타민 D 정제는 표준 1.25% 비타민 D3(Rowimix, 0440140638, lot UEC0605026, DSM Nutritional Products, Brøndby, 덴마크), 100% 비타민 D2(10233619, 배치 095K1306, Sigma)로부터 Viminco A/S(덴마크 Skælskør)에서 생산되었습니다. -Aldrich, Steinheim, Germany) 및 1.25% HY-D(Rowimix, 5002370360, lot WB06605237, DSM Nutritional Products, Brøndby, 덴마크). 비타민 D는 처음에 에탄올에 희석되었습니다. 살생물제로 셀룰로오스와 스테아르산 마그네슘을 사용하여 직경 10mm, 중량 300mg(283~307mg)의 정제를 형성했습니다. 각 정제에는 10μg의 vitD3, vitD2 또는 25OH-D3가 포함되어 있습니다. 정제는 피험자에게 배포될 때까지 최대 5°C의 온도에서 보관되었습니다.
2.1.3. 연구 수행
이 연구는 덴마크 코펜하겐(위도: 55° N)에서 수행되었습니다. 모든 피험자는 2006년 9월에 모집되었고, 준비 기간은 10월 중순에 시작되었으며 연구는 2007년 3월 말에 완료되었습니다. 연구 기간 동안 피험자로부터 혈액 샘플을 5회 수집했습니다. 시작 전, 기준 시점(1일) 및 6주 기간 종료 시(71일, 113일, 155일). 혈액 샘플은 12시간 동안 금식한 후 아침(오전 8시에서 9시 사이)에 숙련된 의료 실험실 기술자가 최대 1/2L의 물을 마실 수 있도록 허용하여 채취했습니다. 피험자들에게는 각 채혈 24시간 전에 어떤 종류의 술도 마시지 말고 힘든 육체 노동도 삼가라는 안내를 받았습니다. 혈청 비타민 D 수준 분석을 위해 5 mL 튜브(vacutainer, 참조 번호 368430, Becton Dickenson, Franklin Lakes, NJ, USA)에 정맥 천자를 통해 혈액을 10 mL 건조 튜브(BD vacutainer, 참조 번호 368430, Becton Dickenson)에 수집했습니다. 367614, Becton Dickenson, Franklin Lakes, NJ, USA) 혈청 부갑상선 호르몬(PTH) 수준 분석 및 7 mL 미량 원소 프리 튜브(Vacutainer, 참조 번호 368380, Becton Dickenson, Franklin Lakes, NJ, USA) ) 칼슘 분석을 위해. 혈액 샘플을 20°C에 보관하고 40분 후 3000xg에서 15 분 동안 원심분리했습니다. 그런 다음 혈청을 플라스틱 튜브로 옮기고 비타민 D 분석을 위해 -80 ° C에서 보관하거나 혈청 칼슘 및 혈청 PTH 분석을 위해 -20 ° C에서 보관했습니다. 인체 측정(신장 및 체중)은 1일차와 155일차에 수행되었습니다. 체중은 전자 디지털 저울(Lindeltronic 8000, Lindells, 스웨덴)을 사용하여 0.1kg까지 측정되었습니다. 피험자들은 속옷만 입고 있었고 체중을 측정하기 전에 방광을 비우도록 요청 받았습니다. 피험자의 키는 피험자가 신발을 벗고 서서 발을 모으고 머리를 수평면에서 똑바로 뻗은 상태에서 가장 가까운 cm 단위로 측정되었습니다. 비타민 D와 칼슘의 습관적 섭취량은 스크리닝 당시 비타민 D 섭취량의 95%와 칼슘 섭취량의 75%에 기여하는 식품(강화 식품 포함)을 확인하는 표준화된 식품 빈도 설문지를 사용하여 추정되었습니다[ 29 ]. 습관적인 생선 섭취, 신체 활동, 전반적인 건강, 흡연 상태 및 알코올 소비를 평가하는 건강 및 생활 양식 설문지가 스크리닝에서 완료되었습니다. 정제 수를 세어 순응성을 평가했습니다.
2.2. 실험실 분석
2.2.1. 정제의 비타민 D
정제 내 비타민 D 화합물의 함량은 중재 기간, 선별 시, 그리고 2개월, 4개월, 5개월 후에 4회 분석되었습니다. 간략하게 말하면, 5개의 정제를 막자사발에서 분쇄하고 1g을 비누화한 후, 실리카 고체상 추출 및 시아노-실리카 제조용 고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 분리된 화합물은 다이오드 어레이 검출기(DAD)와 결합된 역상 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)로 검출되었으며 내부 표준 방법으로 정량화되었습니다[ 18 ]. 분석은 ISO17025에 따라 인증된 실험실에서 수행되었습니다.
2.2.2. 혈청 비타민 D 대사산물
혈청 vitD3(S-vitD3) 및 혈청 25OH-D3(S-25OHD3)[ 30 ] 에 대해 이전에 설명한 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(LC-MS/MS) 방법을 수정하여 혈청 vitD2(S-vitD2)의 정량화를 포함했습니다. ) 및 혈청 25OH-D2(S-25OHD2). vitD3, 25OH-D3, vitD2 및 25OH-D2에 사용된 표준은 Sigma-Aldrich(독일 Steinheim)에서 나온 반면, 중수소화된 내부 표준은 26,26,26,27,27,27- d 6 -비타민 D3( d 6 -vitD3), 26,26,26,27,27,27- d 6 -25OH-D3( d 6 -25OH-D3) 및 26,26,26,27,27,27- d 6 -비타민 D2( d6 - vitD2)는 Chemaphor Inc.(캐나다 온타리오주 오타와)에서 구입하였고, 25,26,27-13C3-25OH - D2(C3-25OH - D2)는 IsoSciences(King of Prussia, PA)에서 구입 했습니다 . , 미국). 즉, 아세토니트릴을 첨가한 후 HybridSPE(Supelco Analytical, Bellefonte, PA, USA)에서 원심분리 및 고체상 추출을 수행하여 단백질을 침전시켰습니다. 질량 분석기의 감도와 선택성을 향상시키기 위해 비타민을 4-페닐-1,2,4-트리아졸린-3,5-디온(Sigma-Aldrich, Steinheim, Germany)으로 유도체화했습니다. 전구체 및 생성물 이온은 vitD3의 경우 m / z 591.4 → 298.0, d 6 -vitD3의 경우 m / z 597.4 → 298.0 , 25OH-D3의 경우 m / z 607.4 → 298.0, d 6 -25OH- 의 경우 m / z 613.4 → 298.0 이었습니다. D3, vitD2의 경우 m / z 603.4 → 298.0, d 6 -vitD2의 경우 m / z 609.4 → 298.0 , 25OH-D2의 경우 m / z 619.4 → 298.0, C 3 -25OH-D2 의 경우 m / z 622.4 → 298.0 . 정확성은 인증된 참조 물질(인간 혈장 1950, NIST, Gaithersburg, MD, USA)을 사용하여 보장되었으며, 연구 기간 동안 일관성을 제어하기 위해 하우스 참조 혈청을 사용했습니다. S-vitD3, S-25OH-D3, S-vitD2, S-25OHD-2의 정밀도(CV%)는 각각 5.0%, 5.0%, 3.7%, 2.5%였다.
비타민 D 대사산물에 대한 분석은 2007년에 HPLC-DAD 방법으로 실행되었지만 2014년 10월에는 보다 구체적이고 정밀한 LC-MS/MS 방법으로 반복되었습니다. LC-MS/MS 방법의 결과만 제시됩니다.
2.2.3. 혈청 온전한 부갑상선 호르몬
혈청 PTH는 고체상 2개 부위 화학발광 효소 표지 면역측정 분석법(IMMULITE 2500 온전한 PTH, Diagnostic Products Corporation, Los Angeles, CA, USA)을 사용하여 샘플링 후 3개월 이내에 측정되었습니다. 분석 내 및 분석 간 정밀도는 각각 CV% = 5.7 및 CV% = 6.3이었으며 기준 범위는 1.12–7.06 pmol/L였습니다.
2.2.4. 혈청 총 칼슘
혈청 총 칼슘은 광도계로 측정되었습니다(Pentra 400, Horiba ABZ, Montpellier, France). Seronorm™ Trace Element Serum L-1(참조 번호 201405, SERO AS, Billingstad, 노르웨이)을 외부 표준으로 사용했습니다. 측정값 2.53 ± 1.13mmol/L이 지정된 범위(2.37~2.67mmol/L) 내에 있었습니다.
2.3. 통계 분석
이는 12명의 건강한 남성이 세 가지 기간에 세 가지 치료를 받은 혈청 내 비타민 D에 대한 3개 기간, 3개 치료 교차 연구였습니다. 기본 결과와 치료별로 기술 통계를 계산했습니다. 결과는 평균 및 표준편차로 표시되었습니다.
주요 분석에는 무작위 사람 효과를 적용한 선형 모델이 사용되었습니다. 무작위 사람 효과는 각 사람이 세 번의 기준 이후 측정을 수행했다는 점을 고려하기 위해 포함되었습니다. 무작위 개인 효과 외에도 모델에는 치료(vitD3, vitD2 또는 25OH-D3) 및 기간(3개 기간)과 관심 결과의 기준 수준 등 고정 요인이 포함되었습니다. 모델의 기본 가정(분산 동질성 및 정규 잔차)은 잔차 플롯과 정규 QQ 플롯을 사용하여 확인되었으며 결과는 로그를 사용하여 변환되어야 함을 보여주었습니다. 그러나 결과는 역변환되어 95% 신뢰구간을 갖는 추정 수준으로 원래 규모로 제시되었습니다. 각 결과에 대해 선형 혼합 모델을 기반으로 전체 치료 효과를 테스트한 후 다중 비교를 조정하기 위해 Sidak 방법을 사용하여 세 가지 치료를 쌍으로 비교했습니다. 본 연구는 교차 연구이므로 기간과 치료 사이의 상호작용을 모델에 포함시켜 이월 효과 가능성을 테스트했지만 이들 상호 작용 중 어느 것도 통계적으로 유의하지 않았으므로( p 값: 0.3~0.8) 이를 바탕으로 데이터에 따르면 이월 효과에 대한 증거는 없었습니다.
vitD3과 비교한 vitD2 및 vitD3과 비교한 25OHD3의 상대적 효과에 대한 불확실성 예산은 각각 보충 자료 표 S2 및 표 S3 에 나와 있습니다 .
모든 통계 분석은 Stata v. 13(StataCorp LP, College Station, TX, USA)을 사용하여 수행되었습니다.
3. 결과
3.1. 과목의 특성
개입에 포함된 12명의 남성의 인체 측정 데이터와 그들의 비타민 D 및 칼슘 섭취량은 다음과 같습니다.1 번 테이블. 연구 기간 동안 피험자의 체중은 크게 변하지 않았습니다. 가장 큰 체중변화는 4kg 증가로 신체활동 감소로 설명되었으나 식습관에는 변화가 없었다. 피험자들은 중재 기간 동안 식단을 바꾸지 않았고 생선 섭취를 일주일에 최대 두 번으로 유지했으며 비타민 보충제 섭취와 일광욕실 방문을 삼갔습니다.
정제 내 비타민 D의 양에 대한 안정성을 테스트했습니다( n = 4). 세 가지 유형의 정제에 대해서는 변화가 확인되지 않았으며, 결과 9.9μg vitD3/정, 10.2μg vitD2/정 및 9.8μg 25OH-D3/정은 공칭 함량인 10μg/정에서 편차가 나타나지 않았습니다.
12명의 남성은 신중하게 선택되었으며 실험 프로토콜을 엄격하게 준수하여 22주간의 개입 연구 동안 샘플링을 놓치지 않았습니다. 연구 전반에 걸쳐 준수율은 97%였습니다.
비타민 D와 칼슘의 평균 섭취량은 다음과 같습니다.1 번 테이블. 피험자들 사이에서 비타민 D와 칼슘의 식이 섭취량 사이에는 유의한 차이가 관찰되었습니다( p < 0.001).
런인 기간 전후의 비타민 D 상태는 12명의 피험자에 대해 23% 증가에서 20% 감소까지 개별적인 효과를 나타냈습니다. 보충 자료 표 S1 에 표시된 데이터 .
3.2. 다양한 비타민 D 비타민을 사용한 개입의 효과
~ 안에표 2, 비타민 D 대사산물, PTH, 칼슘의 혈청 내 측정된 함량이 나열되어 있습니다. "총 25OH-D"는 S-25OH-D3와 S-25OH-D2의 합, 즉 비타민 D 상태입니다. 또한, 동일한 화합물의 추정 수준이 다음 목록에 나열되어 있습니다.표 3. 보충 자료 에서 S-25OH-D에 대해 개별적으로 측정된 모든 데이터는 그림 S1-S3 에 그래픽으로 표시됩니다 .
결과는표 3이는 vitD3, vitD2 또는 25OH-D3로 6주간 치료한 후 S-25OHD3 수준이 유의미하게 다르다는 것을 나타냅니다( p < 0.001). vitD2로 처리하면 S-25OHD3 수준이 가장 낮았고, 25OH-D3으로 처리하면 비타민 D 상태가 가장 높았습니다. 세 가지 치료법은 또한 S-25OHD2의 수준이 상당히 다른 것으로 나타났습니다( p < 0.001). 여기서, vitD2 처리는 S-25OHD2의 최고 수준을 제공한 반면, vitD3와 25OH-D3의 효과는 매우 유사했습니다. S-25OHD의 총량에 대한 처리 효과는 S-25OHD3에 대한 효과와 매우 유사했습니다.
세 가지 치료법은 S-vitD3와 S-vitD2에도 영향을 미쳤습니다. vitD3를 사용한 치료는 다른 두 치료법에 비해 S-vitD3 수준이 상당히 높았습니다. vitD2를 사용한 치료는 S-vitD2의 최고 수준을 가져왔습니다. 혈청 칼슘에 대해서는 치료 효과가 통계적으로 유의하지 않았습니다( p = 0.96). 혈청 PTH의 경우 유의한 차이( p = 0.035)가 관찰되었으나 모든 결과는 참고 범위(1.12~7.06) 내에 있었습니다.
3.3. 비타민 D 상태를 증가시키는 비타민 D 비타머의 상대적 효과
각 개입 기간이 끝날 때 비타민 상태의 차이는 동일한 양의 vitD3로 변환되었습니다. ~ 안에표 3, 비타민 D 상태의 추정 수준은 vitD3, vitD2 또는 25OH-D3에 대해 각각 54.4nmol/L, 43.5nmol/L 및 63.8nmol/L로 제공됩니다. 1μg vitD3의 1.96nmol/L 증가 추정에 근거하여[ 27 ], 10μg vitD2를 매일 보충하면 54.4nmol/L에서 43.5nmol/L로 감소하는 것은 4.44 ± 0.56μg vitD3의 식이 섭취량과 유사합니다. 매일 10μg 25OH-D3를 보충하면 54.4nmol/L에서 63.8nmol/L로 증가하는 것은 14.8 ± 1.9μg vitD3의 식이 섭취량과 유사한 것으로 추정할 수 있습니다. vitD3와 비교하여 vitD2 및 25OH-D3의 전환 계수는 각각 0.44 및 1.5로 추정되었으며, 이는 10 µg VitD3, 6.8 µg 25OH-D3 또는 23 µg VitD2의 식이 섭취가 결과를 가져올 것으로 추정되는 것과 동일합니다. 비타민 D 상태도 비슷하게 증가합니다.
4. 토론
vitD3에 비해 vitD2 및 25OH-D3의 식이 요법의 상대적 효과에 대한 제한된 데이터로 인해 우리는 4주간의 초기 도입 기간 후 혈청 25OHD를 유지하는 데 있어 vitD3, vitD2 및 25OH-D3의 일일 보충 효과를 다음과 같이 비교했습니다. vitD3를 사용하여 20~30세의 건강한 백인 남성 12명을 대상으로 3×6주간의 이중 맹검, 무작위 교차 시험을 통해 항정 상태를 확립했습니다. 우리는 6주 동안 일일 10μg 섭취량에서 vitD3, vitD2 또는 25OH-D3 보충제 사이에 상당한 차이가 있음을 관찰했습니다.
vitD3 1μg당 0.70nmol/L의 추정 증가는 25~250μg vitD3의 일일 보충을 기반으로 한 반면[ 26 ], 1μg vitD3당 1.96nmol/L의 추정 증가는 다음과 같은 일일 보충을 기준으로 얻은 것입니다. 5 µg ~ 15 µg의 vitD3 [ 27 ]. 비타민 D 상태에 대한 곡선적 용량 반응은 매일 10~120μg의 vitD3를 보충한 폐경기 여성에게서 나타났습니다[ 25 ]. 또한, 매일 5μg~50μg의 보충을 조사한 41개 연구를 평가한 종합 연구에서는 vitD3/일 1μg을 추가할 때마다 비타민 D 상태가 2.1nmol/L(95%CI: 1.8~2.5nmol/L) 증가한 것으로 나타났습니다. 24 ]. 우리 연구에서 우리는 Cashman et al.과 유사한 일일 보충 수준을 사용했습니다. (2008), 이것이 우리가 추정에 1.96 nmol/L를 사용한 이유입니다[ 27 ].
vitD3, vitD2 및 25OH-D3 간의 잠재적인 차이를 조사하는 다른 연구와의 비교는 연구 설계의 큰 차이로 인해 주의해서 수행되어야 합니다. Logan 등을 제외하고. (2013)은 꾸준한 비타민 D 상태를 유지하는 것을 목표로 했으나[ 31 ] 다른 모든 연구 설계는 S-25OHD를 증가시키는 다양한 비타민 D 종의 능력에 중점을 두었습니다. 매일 5~25μg vitD3를 보충한다고 해서 반드시 비타민 D 상태가 같은 수준으로 증가하는 것은 아닙니다. 예를 들어, 15μg vitD3/일은 비타민 D 상태의 증가[ 32 , 33 ]와 감소[ 27 ]를 모두 보여주었습니다. 오류의 잠재적 원인은 여러 연구에 적용된 분석 방법의 차이[ 23 , 34 , 35 ]와 개입 연구 설정의 차이입니다(예: 비타민 증가에 영향을 미치는 시작 시 비타민 D 상태). D 상태 [ 36 ].
메타 분석에서는 vitD3 및 vitD2 보충제를 매일 투여했을 때 비타민 D 상태에 차이가 없는 것으로 확인되었습니다[ 6 ]. 메타 분석에는 vitD2 및 vitD3 25μg을 매일 보충하는 25주간의 장기 연구는 포함되지 않았는데, 그 결과 vitD3 그룹보다 vitD2 그룹에서 비타민 D 상태가 더 낮았습니다[ 31 ]. 또한, 대안적인 추정 방법은 AUC(곡선 아래 면적)를 계산하는 것입니다. 이는 최근 발표된 4주간의 중재 연구에서 맥아 음료에 하루 두 가지 수준(5μg 또는 10μg)에 첨가된 vitD2와 vitD3를 비교하는 것입니다. µg vitD는 vitD2와 vitD3를 투여받은 그룹 사이에 AUC에 차이가 없음을 보여주었습니다[ 37 ].
두 화합물에 대해 일일 보충 및 동일한 기간으로 설계된 인간 개입 연구에서 비타민 D 상태에 대한 25OH-D3 및 vitD3의 효과 비교는 두 가지 연구로 제한됩니다. 한 연구에서는 10주 동안 20μg vitD3, 20μg 25OH-D3 또는 7μg 25OH-D3의 일일 보충을 비교했습니다[ 8 ]. 기준선부터 개입이 끝날 때까지 비타민 D 상태의 변화를 고려하여 25OH-D3에서 vitD3로의 전환 계수는 5로 계산되었습니다. AUC 방법은 폐경 후 여성을 대상으로 15주 동안 매일 보충제를 섭취한 후 다른 연구에서 적용되었습니다. 20 µg vitD3 또는 25OH-D3는 vitD3보다 25OH-D3 곡선 아래 면적이 2~3배 더 높습니다. [ 9 ] 우리의 가설은 비타민 D 대사산물이 유사한 비타민 D 상태를 유지할 수 있다는 것이었습니다. 우리는 이 가설을 기각해야 했고, 세 가지 비타민 D 비타민 사이의 추정된 차이는 이전 결과와 일치하지 않았습니다. 세 가지 비타민 D 활성 화합물이 포함된 다른 연구는 없습니다.
Tripkovicet al. (2012)은 비타민제 간의 상대적인 차이를 평가하기 위한 노력에서 보충 전략을 고려해야 함을 확인했습니다[ 6 ]. 따라서 주요 비타민 D 활성 화합물인 vitD3, vitD2 및 25-수산화 화합물 간의 상대적인 차이를 평가하기 위한 노력에는 두 가지 전략이 필요할 수 있습니다. 임상 목적의 경우, 결핍을 근절하기 위해 극도의 대량 투여가 필요하지만, 식품 내 비타민 D 대사산물의 기여도를 추정하려면 전환 계수가 보다 영양학적으로 관련된 일일 섭취량을 기반으로 해야 합니다.
우리의 목표는 식단에 존재하는 각 비타민 활성 화합물의 효능을 추정하는 것이었습니다. 25OH-D3의 반감기가 15일로 추정된다는 사실을 토대로 6주간의 개입 기간을 사용하였다[ 17 , 38 ]. 또한, 이전에는 젊은이와 노인 남성의 경우 20μg vitD3[ 36 ], 건강한 성인의 경우 25μg vitD3[ 15 ], 5μg의 일일 보충 후에 6주간 매일 보충한 후 안정화된 비타민 D 상태가 관찰되었습니다. 노인 여성의 경우 10μg 및 20μg vitD3 [ 39 ]. 전체 연구 기간이 10월부터 3월까지로 제한되어 있기 때문에 피험자가 매일 10μg vitD3 보충제를 섭취하여 개인의 정상 상태 수준을 얻는 데 4주간의 준비 기간만 사용되었습니다. 더욱이, 세 가지 개입 기간 각각 앞에 도입 기간을 포함하는 것이 불가능했습니다. 그러나 vitD2 또는 25OH-D3의 개입 기간이나 vitD3의 도입 기간 이후 6주 동안 vitD3를 보충한 후에는 결과에 유의미한 차이가 나타나지 않았습니다. 피험자들은 평소 식이 요법을 계속할 수 있었으며, 이는 10μg vitD의 일일 보충을 방해하지 않도록 각 피험자에 대한 일일 vitD 기초 섭취량의 일관성을 확보했습니다. 그럼에도 불구하고 vitD의 저장은 개입 기간이 끝날 때 비타민 D 상태에 영향을 미칠 수 있습니다. 그러나 미니돼지에서 라벨이 붙은 vitD3 보충제를 조사한 결과, 저장된 vitD3의 비타민 D 상태에 대한 기여도가 6주 이내에 약 50nmol/L에서 5nmol/L로 감소한 것으로 나타났습니다[ 40 ].
우리가 교차 설계를 사용한 이유는 BMI[ 25 ] 및 유전적 차이[ 41 ] 에 대한 의존성을 포함하는 개인차에 대한 개인적 의존성을 효율적으로 극복하기 위한 것이었습니다 . 백인 덴마크 인구의 경우 GC 및 CYP2R1 의 다형성이 S-25OHD 상태와 연관되어 있는 것으로 나타났습니다 [ 42 ]. 우리의 가설은 각 보충 기간 이후의 비타민 D 상태가 각 피험자에게 동일할 것이며, 각 치료가 끝날 때의 비타민 D 상태는 시작 수준과 무관할 것이라는 것이었습니다. 12명의 피험자 각각은 vitD3, vitD2 및 25OH-D3의 6가지 다른 순서 중 하나의 보충을 받도록 무작위로 선택되었습니다. vitD3 보충 기간이 끝난 후의 비타민 D 상태에 대해 우리는 주어진 보충 기간의 시작 수준, 즉 이 기간 이전의 피험자가 6주 동안 vitD2 보충(낮은 비타민 D 상태)을 받았는지 여부에 의존하지 않는 것을 관찰했습니다. 6주간 25OH-D3 보충(더 높은 비타민 D 상태). 이는 각 피험자가 "안정 상태"라고 부르는 특정 보충 수준에 대해 특정 수준의 비타민 D 상태를 가질 것이라는 가정이 사실임을 나타냅니다.
비타민 D 상태에 대한 효과 외에도, 폐경기 여성을 대상으로 한 4개월 연구에서 vitD3 대비 25OH-D3 20μg을 매일 보충하면 vitD3 대비 25OH-D3가 보행 속도를 18% 향상시키는 것으로 나타났습니다. 트렁크 흔들림에 대해 시연됩니다 [ 43 ]. 또한, 25OH-D3 치료는 vitD3보다 무릎 확장 강도를 향상시키고 수축기 혈압을 감소시키며 선천 면역 지표를 더 뚜렷하게 감소시켰습니다[ 44 ].
비타민 D에 대한 대부분의 개입 연구는 폐경 후 여성이나 노인 여성 및 남성에 초점을 맞췄습니다[ 45 ]. 보충으로 인한 비타민 D 상태의 증가를 조사하기 위한 연구에서는 젊은 남성과 노인 사이에 차이가 확인되지 않았으며[ 36 ], 성별 간의 차이도 이전에 설명되지 않았습니다[ 8 , 28 ]. 이 연구에서 우리는 건강한 인구 집단에서 비타민 D의 식이 섭취 효과에 초점을 맞추고 동질적인 젊은 남성 그룹에 초점을 맞추기로 결정했습니다. 우리가 젊은 남성만을 포함했다는 사실은 우리 연구의 한계입니다. 본 연구에서 젊은 남성의 vitD3 보충 후 평균 비타민 D 상태는 55nmol/L인 반면, 건강한 폐경 후 덴마크 여성을 대상으로 한 이전 연구에서는 평균 비타민 D 상태가 64nmol/L인 것으로 나타났습니다[ 46 ]. 따라서 비타민 D 상태에 성별 및 연령 차이가 발생할 수 있다는 점을 배제할 수 없습니다. 피험자 수는 비타민 D 대사산물 간의 절대 차이를 평가하는 데 제한이 있는 반면, 본 연구의 강점은 비타민 D 대사산물 정량화를 위한 MS/MS 기술의 사용과 결합된 교차 설계입니다.
VitD3는 일반적으로 식품의 주요 형태입니다. 그러나 vitD2는 야생 버섯의 주요 비타민 D 형태이며 EU에서 판매가 승인된 vitD2 강화 양송이버섯[ 47 ]이며, 25OH-D3는 쇠고기와 간에서 주요 비타민 D 대사산물입니다[ 48 ]. 비타민 D의 총 함량은 vitD3 및 25OH-D3 함량으로 추정한 5배에 비해 1.5배로 30~50% 더 낮습니다[ 48 ].
vitD2와 25OH-D3의 효능이 vitD3의 효능과 비교하여 각각 0.44와 1.5라는 결과를 검증하려면 추가 연구가 필요합니다. 우리는 최적의 연구 설계가 준비 기간을 포함하는 교차 설계인 반면, 항정 상태 수준을 보장하기 위해 각 비타민 D 대사산물에 대해 개입 기간을 8주 또는 12주로 연장할 수 있다고 제안합니다.
5. 결론
이 연구에서 우리는 비타민 D3, 비타민 D2 및 25-하이드록시비타민 D3가 비타민 D 상태에 동일하게 영향을 미친다는 가설을 세웠습니다. 그러나 얻은 결과를 바탕으로 우리는 가설을 기각했습니다. 비타민 D 상태는 비타민 D3 보충 후와 비교하여 25-하이드록시비타민 D3 보충 후 증가했고, 비타민 D2 보충 후에는 감소했습니다. 하루 1μg의 비타민 D3가 1.96 nmol/L의 비타민 D 상태를 증가시킨다는 추정에 기초하여, 비타민 D2와 25-하이드록시비타민 D3의 섭취량은 0.44와 1.5를 곱하여 비타민 D3와 유사한 함량으로 전환되었습니다. 각기. 이러한 전환 요인이 올바른지 테스트하기 위해 우리는 매일 10μg의 비타민 D3, 23μg의 비타민 D2 및 6.8μg의 25-하이드록시비타민 D3를 보충하면 동일한 비타민 D 상태가 된다는 가설을 테스트하는 유사한 연구를 제안합니다. 우리의 결과는 개별 비타민 D 활성 화합물의 화학적 정량화를 기반으로 비타민 D 활성을 평가하는 방법에 대한 논의에 기여합니다. 개별 비타민 D 대사물질의 비타민 D 활성 기여에 대한 국제적 합의에 도달하려면 추가 조사가 필요합니다.
감사의 말
저자들은 연구를 수행하는 데 도움을 준 Helle K. Jensen과 비타민 D 분석에 능숙한 기술 지원을 제공한 Astrid Kvindebjerg에게 감사드립니다.
보충 자료
다음 내용은 http://www.mdpi.com/2072-6643/10/1/12/s1 에서 온라인으로 확인할 수 있습니다 . 그림 S1: 12명의 참가자를 대상으로 연구 중에 관찰된 S-25OHD3, 그림 S2: 관찰된 S-25OHD2 12명의 참가자를 대상으로 한 연구 기간 동안 관찰된 총 S-25OHD, 즉 12명의 참가자를 대상으로 한 연구 기간 동안 S-25OHD2와 S-25OHD3의 합, 표 S1: 일일 섭취 기간 전후의 비타민 D 상태 10μg vitD3 보충. 순서는 피험자가 어떤 치료 패턴을 따랐는지 알려주는 6개 수준의 요소입니다. 표 S2: vitD3와 비교한 vitD2의 상대적 효과에 대한 불확실성 예산, 표 S3: vitD3와 비교한 25OH-D3의 상대적 효과에 대한 불확실성 예산.
비타민 D 보충과 사망률의 연관성: 체계적 검토 및 메타 분석
아스코르빈산의 항산화 및 항염증 활성
